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      人胸苷酸合成酶(TS)ELISA試劑盒實驗原理
      點擊次數:1297 更新時間:2011-11-01

      胸苷酸合成酶(TSELISA試劑盒實驗原理

       

      本試劑僅供研究使用       目的:本試劑盒用于測定人血清,血漿及相關液體樣本中胸苷酸合成酶(TS活性。

      實驗原理:

        本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人胸苷酸合成酶(TS水平。用純化的人胸苷酸合成酶(TS抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入胸苷酸合成酶(TS),再與HRP標記的胸苷酸合成酶(TS抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMBHRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的胸苷酸合成酶(TS呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人胸苷酸合成酶(TS濃度。

      試劑盒組成

      試劑盒組成

      48孔配置

      96孔配置

      保存

      說明書

      1

      1

       

      封板膜

      2片(48

      2片(96

       

      密封袋

      1

      1

       

      酶標包被板

      1×48

      1×96

      2-8℃保存

      標準品:72U/L

      0.5ml×1

      0.5ml×1

      2-8℃保存

      標準品稀釋液

      1.5ml×1

      1.5ml×1

      2-8℃保存

      酶標試劑

      3 ml×1

      6 ml×1

      2-8℃保存

      樣品稀釋液

      3 ml×1

      6 ml×1

      2-8℃保存

      顯色劑A

      3 ml×1

      6 ml×1

      2-8℃保存

      顯色劑B

      3 ml×1

      6 ml×1

      2-8℃保存

      終止液

      3ml×1

      6ml×1

      2-8℃保存

      濃縮洗滌液

      20ml×20倍)×1

      20ml×30倍)×1

      2-8℃保存

       

      樣本處理及要求

      1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。

      2. 血漿:應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。

      3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。

      4. 細胞培養上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBSPH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。

      5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBSPH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBSPH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。

      6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.

      7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

      試劑盒性能:

      1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.92以上。

      2.批內與批見應分別小于9%15%

      保存條件及有效期:

      1.試劑盒保存:2-8

      2.有效期:6個月

       

      滬公網安備 31011802001678號

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